In neuromuscular research, selecting the appropriate culture media is essential for optimal cell maintenance and functional studies. Two key types of media commonly used are "growth media" and "differentiation media", each serving distinct purposes.
"Growth Media:"
Growth media is designed to support the proliferation and maintenance of skeletal muscle cells. It typically consists of:
- Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium/Nutrient Mixture F-12 (DMEM/F-12) with 2.5 mM L-glutamine and 15 mM HEPES (GIBCO)
- Skeletal muscle growth medium supplement mix (Promocell, #C-39365)
- 50 units/mL penicillin and 50 μg/mL streptomycin (GIBCO)
- 20% fetal bovine serum (FBS)
A common practice involves preparing a **basal medium** by pre-mixing DMEM/F-12, the supplement mix, and antibiotics. FBS is then added to the basal medium just before use to create the complete growth medium. This method helps prevent the deterioration of the medium and ensures optimal cell health.
"Differentiation Media:"
Differentiation media is crucial for promoting the fusion of myoblasts into myotubes, a key step for studying muscle physiology and neuromuscular diseases. It includes:
- DMEM/F-12 with 2.5 mM L-glutamine and 15 mM HEPES
- 50 units/mL penicillin and 50 μg/mL streptomycin (GIBCO)
- 2% heat-inactivated horse serum
Similar to the growth media, horse serum is added to DMEM/F-12 immediately before use to ensure the stability and effectiveness of the medium.
Thermo Fisher Scientific
محیط رشد و محیط تمایز در آزمایشگاه‌های عصبی-عضلانی
در پژوهش‌های عصبی-عضلانی، انتخاب محیط کشت مناسب برای نگهداری و مطالعه عملکرد سلولی ضروری است. دو نوع محیط اصلی شامل محیط رشد و محیط تمایز، هر یک با اهداف خاص خود استفاده می‌شوند.
محیط رشد:
محیط رشد برای تکثیر و نگهداری سلول‌های عضله اسکلتی طراحی شده و شامل موارد زیر است:
DMEM/F-12 (با 2.5 میلی‌مولار ال-گلوتامین و 15 میلی‌مولار HEPES)
مکمل محیط رشد عضله اسکلتی (Promocell, #C-39365)
50 واحد/میلی‌لیتر پنی‌سیلین و 50 میکروگرم/میلی‌لیتر استرپتومایسین
20% سرم جنینی گاوی (FBS)
برای آماده‌سازی، DMEM/F-12، مکمل رشد و آنتی‌بیوتیک‌ها به عنوان محیط پایه مخلوط شده و سرم جنینی گاوی درست قبل از استفاده به محیط اضافه می‌شود تا از تخریب محیط جلوگیری شود.
محیط تمایز:
محیط تمایز برای القای تمایز میوبلاست‌ها به میوتیوب‌ها استفاده شده و شامل:
DMEM/F-12 (با 2.5 میلی‌مولار ال-گلوتامین و 15 میلی‌مولار HEPES)
50 واحد/میلی‌لیتر پنی‌سیلین و 50 میکروگرم/میلی‌لیتر استرپتومایسین
2% سرم اسب غیرفعال شده با حرارت
برای حفظ کیفیت، سرم اسب بلافاصله قبل از استفاده به محیط پایه اضافه می‌شود. آماده‌سازی صحیح این محیط‌ها برای دست‌یابی به نتایج دقیق در پژوهش‌های عضله اسکلتی ضروری است.
