زمینه
دیستروفی عضلانی دوشن (DMD) یک اختلال ژنتیکی شدید است که به علت جهش‌های ژن DMD ایجاد می‌شود. این جهش‌ها باعث نقص در تولید پروتئین دیستروفین می‌شوند که برای عملکرد عضلات ضروری است. درمان‌های فعلی، مانند الیگونوکلئوتیدهای حذف اگزون، به دلیل عمر کوتاه و نیاز به تزریق‌های مکرر محدودیت دارند.
هدف
این مطالعه استفاده از وکتور ویروس مرتبط با آدنو (scAAV9) را بررسی کرده که RNA کوچک هسته‌ای U7 (snRNA) را بیان می‌کند تا اگزون ۲ ژن DMD را هدف قرار داده و تولید دیستروفین را بازیابی کند.
روش‌ها
این وکتور در مدل موشی Dup2 با تکثیر اگزون ۲ آزمایش شد. دو استراتژی مورد بررسی قرار گرفت:
- تزریق سیستمیک یک‌بار در مراحل نوزادی یا بلوغ.
- درمان همزمان با پردنیزولون.
اثربخشی درمان با استفاده از RT-PCR، وسترن بلات، ایمنوفلورسانس و ارزیابی‌های بافت‌شناسی بررسی شد.
یافته‌ها (بالغین)
تزریق در موش‌های دو ماهه منجر به 69-95٪ حذف اگزون و بازسازی قابل‌توجه دیستروفین شد. آزمایش ایمنوفلورسانس نشان داد:
- 33-53٪ شدت بیان دیستروفین افزایش یافته است.
- تا 79٪ فیبرهای مثبت، که ساختار و عملکرد عضلات را بهبود بخشید.
یافته‌ها (نوزادان)
تزریق در نوزادان تا 99٪ فیبرهای مثبت دیستروفین را بازیابی کرد و اصلاح تقریباً کامل بیماری طی شش ماه مشاهده شد. مزایای این روش شامل:
- حذف مداوم اگزون و تولید قوی دیستروفین.
- بدون مشاهده اثرات جانبی قابل توجه.
نتیجه‌گیری
نتایج نشان می‌دهد که وکتور scAAV9.U7snRNA.ACCA بازسازی پایدار و قوی دیستروفین را فراهم می‌کند و پتانسیل درمانی آن برای DMD، به ویژه برای تکثیر اگزون ۲، تأیید شده است.
| Field | Details |
| Authors | Nicolas Wein, Tatyana A. Vetter, Adeline Vulin, Tabatha R. Simmons, Emma C. Frair, Adrienne J. Bradley, Liubov V. Gushchina, Camila F. Almeida, Nianyuan Huang, Daniel Lesman, Dhanarajan Rajakumar, Robert B. Weiss, Kevin M. Flanigan |
| Corresponding Authors | Nicolas Wein (nicolas.wein@nationwidechildrens.org), Kevin M. Flanigan (kevin.flanigan@nationwidechildrens.org) |
| Article Title | Systemic delivery of an AAV9 exon-skipping vector significantly improves or prevents features of Duchenne muscular dystrophy in the Dup2 mouse |
| Publication Date | 1-Sep-22 |
| Journal Name | Molecular Therapy: Methods & Clinical Development |
| Keywords (English) | #DuchenneMuscularDystrophy #DMD #GeneTherapy #ExonSkipping #AAV9 #U7snRNA #DystrophinRestoration #Dup2MouseModel |
| Methods Used | Gene therapy, RT-PCR, Western blot, Immunofluorescence, Histopathology, qPCR, Ribosome Profiling, RNA sequencing |
| DOI | 10.1016/j.omtm.2022.07.005 |
